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luminex多因子检测样本收集方法

ProcartaPlex™多因子免疫检测用于 Luminex® 平台,以更少量的样本完成对更多生物标志物的分析。使实验者可以在25-50μL的样本(血浆、血清、细胞培养上清液以及其他体液)。实现在25-50μL的样本中同时对多达50种因子进行检测与定量。该技术在多通道“类ELISA”分析中,为每种靶标使用了经不同染色处理的捕获微球。相比于传统的ELISA而言,ProcartaPlex免疫分析可以在使用样本量少而时间相同的情况下,分析多达50倍数量的因子。ProcartaPlex多通道免疫分析提供了多种试剂盒类型,涵盖六个物种(人类、小鼠、大鼠、非人灵长类、猪以及犬类),从而满足实验者的研究需求。

正确的样本收集整理方法,是实验成功至关重要的步骤. 目前ProcartaPlex可以检测样本类型有: 细胞上清、血清、血浆. 尽管其他生物学样本没有经过验证,但是理论上也可以检测,这些样本包括: BAL, 唾液,CSF, 组织匀浆液和尿液。

下面我们针对几种常见样本的收集、保存方法:
1、血清
全血室温(20-25 °C)凝固20-30min;
室温1,000 x g 10min;
收集上清,或者选择使用血清分离器;
可选:如果样本是高血脂样本,请先在2-8°10,000 x g 离心 10min,分离出下层血清;
多因子检测血清样本要求新鲜;如果不能在24h内检测,需要分装在-20 ℃以下,避免反复冻融。
2、血浆
根据要求选择柠檬酸或EDTA作为抗凝剂。如果选择肝素作为抗凝剂,建议每毫升血不超过10IU肝素(肝素用量过高,可能会导致部分检测指标值偏高)。
收集抗凝全血后30min内,在4oC 下10,000 x g离心10min,分离收集血浆;
可选:可选:如果样本是高血脂样本,请先在2-8°10,000 x g 离心 10min,分离出下层血浆;
多因子检测血浆样本要求新鲜;如果不能在24h内检测,需要分装在-20 ℃以下,避免反复冻融。
3、细胞培养上清
检测分泌性的成份时,最好用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
4、组织样本
如果可以,请按照参考文献推荐的方法。标本取完后液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的含有蛋白酶抑制剂的缓冲液, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
保存过程中如果有沉淀,检测前样本应该再次离心去除沉淀,建议16,000 x g 离心5min。

0512-67414081