原代细胞复苏技术

细胞的复苏过程：
1）从液氮罐中取出细胞；
2）管盖拧松1/4，10 s，释放出可能存在管中的液氮，然后拧紧管盖；
3）将该管放在37°C水中，小心转动，使其内容物溶解；复苏细胞时，注意勿使水进入冻存管内；
4）立即将管从水中取出，擦干，放置在无菌环境；
5）用70％乙醇擦干；
6）拧开管盖，注意不要让手指碰到管口螺旋处，用1 ml的移液枪，吸出管内液体；
7）将细胞铺在包被多聚赖氨酸的培养皿上。细胞密度为：5000细胞/cm2 ；
8）盖上管帽，放回原处，小心的摇培养皿，使细胞分布均匀；
9）将培养皿放入培养箱（37°C, 5% CO2 /95% air）；
10）6-16小时更换培养基，除去剩余的DMSO和没有吸附的死细胞。